關於Kromasil色譜柱活化指南

每當購買(mai) 一根新色譜柱時，活化衝(chong) 洗是一個(ge) 必須操作的步驟。

全新色譜柱一般都是保存在一定的保護液中的。活化的目的是將新柱中的封存液替換，並且衝(chong) 洗掉色譜柱中的雜質。還可以排除色譜柱中有機溶液的揮發所產(chan) 生的氣泡殘留，發揮色譜柱的效能。不僅(jin) 如此，活化還能使色譜柱內(nei) 矽膠上的鍵合基團達到更好的排列，有利於(yu) 樣品的分離。

Kromasil色譜柱根據不同固定相情況，推薦以下活化方法，其他品牌色譜柱需要在谘詢廠商技術工程師確認後進行參考。

1、反相色譜柱（C18、C8、Phenyl、PhenylHexyl等）

①    80%甲醇（乙腈）-水溶液，低流速衝(chong) 洗20-30個(ge) 柱體(ti) 積；

②    50%甲醇（乙腈）-水溶液，低流速衝(chong) 洗20-30個(ge) 柱體(ti) 積；

③    初始比例流動相平衡10-30個(ge) 柱體(ti) 積。

*若流動相中含有緩衝(chong) 鹽，則需要在步驟③中采用無緩衝(chong) 鹽的初始比例流動相進行平衡後，額外增加步驟④使用含有緩衝(chong) 鹽得初始比例流動相平衡10-30個(ge) 柱體(ti) 積。

2、正相色譜柱（SIL、NH、CN等）

①    流動相平衡20-30個(ge) 柱體(ti) 積；

*若需要在反相條件下使用氨基、氰基等固定相的正相柱，需要參照以下步驟執行：

①    100%異丙醇溶液衝(chong) 洗50-100個(ge) 柱體(ti) 積；

②    初始比例流動相平衡20-30個(ge) 柱體(ti) 積。

3、HILIC色譜柱（HILIC-D等）

①    50%乙腈-水溶液衝(chong) 洗50個(ge) 柱體(ti) 積；

②    初始比例流動相平衡10-20個(ge) 柱體(ti) 積。

注意：任何含有緩衝(chong) 鹽的流動相都需要在無緩衝(chong) 鹽的初始比例流動相充分平衡後方才使用含有緩衝(chong) 鹽得溶液進行平衡，否則將出現鹽析等不可逆色譜柱損害。並且，在進行色譜柱活化及使用時需要反複確認溶液間的互溶性。

以下為(wei) 常見Kromasil色譜柱出廠封存溶液參考

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