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HPLC故障排查及解決之壓力異常

更新時間:2024-01-18  |  點擊率:1256

圖片


#前提概要#


日常HPLC分析過程中,故障排查是一項令人頭疼且複雜的事項。當出現問題時,如若不能及時解決(jue) 那麽(me) 將會(hui) 影響後續分析,甚至可能損壞設備造成更為(wei) 麻煩的境況。因此當遇到問題時,需要及時發現的同時,能找到問題且解決(jue) 問題也是十分重要的技能。今天我們(men) 將對液相係統壓力異常進行梳理與(yu) 分析。

HPLC係統壓力

當異常壓力出現時,我們(men) 首先要了解的是正常的係統壓力值。因此養(yang) 成記錄係統壓力的習(xi) 慣是十分重要的,定期的記錄將在我們(men) 進行問題排查時帶來判斷依據。

常見的液相分析係統的耐壓通常是40MPa左右,常見的分析方法一般壓力值為(wei) 10~20MPa之間。UHPLC係統的耐壓可達100MPa以上,日常分析方法壓力一般在50~100MPa之間。

TIps

壓力換算1MPa=10bar=145Psi 


理想情況下的壓力於(yu) 梯度洗脫中應該是恒定不變的,但是根據應用的差異,其出現1%~2%的上下浮動也屬於(yu) 正常,並且壓力與(yu) 流動相使用關(guan) 係更為(wei) 密切。常見的甲醇與(yu) 乙腈使用過程中,我們(men) 會(hui) 發現甲醇的係統壓力一般高於(yu) 乙腈。

下圖例舉(ju) 了一些常見情況的混合溶劑壓力,供日常參考。

素材.png

*以純水與(yu) 有機溶劑混溶,色譜柱為(wei) 250*4.6mm 5μm,柱溫35℃流速為(wei) 2mL/min測算。

此時,當我們(men) 了解到係統日常壓力運行情況時,我們(men) 需要對係統壓力上限進行合理設置。係統壓力上限於(yu) 軟件工作站中可以進行設置,並且超過設置壓力值時會(hui) 觸發停泵以保護設備。有些設備可以設置下限壓力,下限壓力主要是應對流動相吸幹,根據實際情況進行設置可以對流動相吸幹時的係統進行有效保護。


壓力異常排查與(yu) 解決(jue)

係統異常壓力主要有壓力過高、壓力過低、壓力波動等情況,今天我們(men) 主要討論壓力過高的情況。


當我們(men) 發現壓力過高時,首先需要想到係統堵塞。樣品大批量分析時,樣品中殘留的細微顆粒於(yu) 在線過濾器、柱頭篩板等處聚集,此時我們(men) 會(hui) 發現壓力逐漸上升。此時屬於(yu) 正常現象,當我們(men) 對於(yu) 儀(yi) 器及色譜柱及時維護後,將會(hui) 恢複正常。係統的壓力與(yu) 色譜柱也有關(guan) 聯,比如同等情況下內(nei) 徑越細、粒徑越小、柱長越長的色譜柱壓力便會(hui) 越高。


當我們(men) 發現係統壓力異常增高時,我們(men) 要了解可能發生的原因。基質較髒、未溶解的緩衝(chong) 鹽、係統中脫落的固體(ti) 堵塞係統時,壓力自然而言會(hui) 上升,甚至觸發上限警報。此時我們(men) 就需要找出問題的根源。


從(cong) 色譜柱起始,一路到泵的管線及部件中都有可能,我們(men) 需要逐級排查。如果我們(men) 擰鬆某個(ge) 接頭時,發現壓力突然下降,那麽(me) 需要懷疑堵塞出現在它的下遊。當擰下色譜柱時,係統將會(hui) 出現壓力快速下降,如果其壓力值未恢複至係統最底壓力(通常為(wei) <1MPa)。那麽(me) 需要懷疑此時並非色譜柱問題。則需要繼續向上排查,例如在線過濾器、單向閥等部件。


一旦我們(men) 找到問題根源,那麽(me) 就需要對堵塞部分進行衝(chong) 洗,熱水及酸性溶液是較為(wei) 常見的衝(chong) 洗方法。但是當色譜柱出現堵塞時,則需要根據色譜柱類型進行衝(chong) 洗。

Q1

複習(xi) 一下

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當我們(men) 解決(jue) 問題後,並不能掉以輕心,因為(wei) 問題的發生並非偶然。我們(men) 需要根據此次排查的結果對分析方法或實驗習(xi) 慣加以修正並將過程記錄供後續參考。例如樣品基質及流動相緩衝(chong) 鹽導致的堵塞,可以考慮使用針式過濾器進行過濾等。


若是緩衝(chong) 鹽、樣品析出導致的堵塞,則更需要注意,是否為(wei) 方法中緩衝(chong) 鹽濃度、梯度設置不合理導致的。那麽(me) 此時需要對分析方法進行及時修正。


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